體外診斷試劑性能評估--線性范圍

要求：體外診斷試劑盒校準(zhǔn)品的濃度應(yīng)覆蓋整個廠家聲明的線性范圍的系列濃度。

繪制散點圖及離群值的發(fā)現(xiàn)和處理：散點圖的繪制對于線性范圍評價非常重要，其作用包括：

①　初步獲得數(shù)據(jù)的線性關(guān)系（直線、拋物線或S型曲線等），以初步核實企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中聲明的線性回歸方程的正確性。

②　觀察數(shù)據(jù)的精密性，當(dāng)與其他濃度相比某個濃度水平精密度較低時，特別是發(fā)生在聲明的線性范圍的兩端，應(yīng)注意線性范圍是否過寬的情況；發(fā)現(xiàn)離群值，明顯的離群值可以通過觀察散點圖被容易的發(fā)現(xiàn)。若只有一個離群值，則可剔除，不必重復(fù)實驗，但當(dāng)離群值多于一個時，應(yīng)仔細(xì)分析，找出問題所在并重復(fù)實驗，然后使用新數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

線性回歸分析：使用企業(yè)聲明的方程，通過適當(dāng)?shù)能浖?，對?shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，置信水平一般為雙側(cè)0.05，計算方程的相關(guān)系數(shù)r或確定系數(shù)R2，應(yīng)符合企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定。根據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，相關(guān)系數(shù)r的絕對值一般應(yīng)不小于0.98。當(dāng)散點圖明顯提示擬合的曲線可能過原點時，或數(shù)據(jù)計算是已扣除零點樣本讀數(shù)時，應(yīng)注意檢驗回歸方程中的截距項。

要求：定量體外診斷試劑產(chǎn)品注冊檢驗線性評價涉及的樣本通常是臨床樣本、企業(yè)內(nèi)部校準(zhǔn)品、國家參考品或國際標(biāo)準(zhǔn)品等。他們應(yīng)為不少于5個、能覆蓋整個廠家聲明的線性范圍的系列濃度的樣本，每個濃度水平樣本測定不少于2次。各樣本可以是絕對濃度或相對值來標(biāo)識。理想的情況下，應(yīng)使用高值和低值臨床樣本按比例混合得到系列濃度的樣本，這主要考慮基質(zhì)效應(yīng)對檢測結(jié)果的影響。

繪制散點圖及離群值的發(fā)現(xiàn)和處理：同校準(zhǔn)品的線性范圍評價。

線性回歸分析：通過適當(dāng)?shù)能浖?shù)據(jù)分析擬合一次多項式（y=b₀+b₁x）、二次多項式（y=b₀+b₁x+b₂x²）和三次多項式（y=b₀+b₁x+b₂x²+b₃x³）回歸方程，計算回歸系數(shù)的統(tǒng)計學(xué)顯著性（t檢驗）和回歸標(biāo)準(zhǔn)物，置信水平一般為雙側(cè)0.05。一次多項式回歸方程即為直線回歸方程。當(dāng)多個方程的回歸系數(shù)均有顯著性時，應(yīng)將回歸標(biāo)準(zhǔn)物最小的方程判定為最優(yōu)方程。

①　若企業(yè)聲稱數(shù)據(jù)應(yīng)符合線性（直線回歸方程），且二次方程的回歸系數(shù)b2，或三次方程的回歸系數(shù)b2或b3無統(tǒng)計學(xué)顯著性，則試劑盒線性符合相應(yīng)評價標(biāo)準(zhǔn)的要求；若二次方程的回歸系數(shù)b2，或三次方程的回歸系數(shù)b₂或b₃有統(tǒng)計學(xué)顯著性，則需要比較各樣品下最優(yōu)方程與直線回歸方程待測物濃度預(yù)測值的差值。若各樣品下濃度預(yù)測值的差值均小于事先設(shè)定的允許誤差，則仍可以認(rèn)為數(shù)據(jù)符合直線回歸方程，判為線性；若存在個別濃度水平的差值大于事先設(shè)定的允許誤差，且濃度水平分布于線性范圍兩端，則需剔除這些濃度點，縮小線性范圍，再次擬合回歸方程，重新進(jìn)行評價。重新評價后，若數(shù)據(jù)仍不符合直線方程，則該試劑盒數(shù)據(jù)不符合評價標(biāo)準(zhǔn)壓迫器（非線性）。

②　若企業(yè)聲稱數(shù)據(jù)應(yīng)符合非直線回歸方程，且數(shù)據(jù)擬合顯示二次方程的回歸系數(shù)b₂，或三次方程的回歸系數(shù)b₂或b₃有統(tǒng)計學(xué)顯著性，則可認(rèn)為試劑盒線性范圍符合相應(yīng)評價標(biāo)準(zhǔn)的要求，否則可以認(rèn)為不符合標(biāo)準(zhǔn)的相應(yīng)要求。

③　由于在不同的線性范圍區(qū)間，測量誤差可為一個非恒定的值按比例變動，這時允許誤差用百分比表示，上述某濃度水平下，最優(yōu)方程與直線回歸方程濃度預(yù)測值的差值需除以該水平的試劑測量值的均值。允許誤差應(yīng)符合企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)的相應(yīng)要求，一般為5%或不差過該項目臨床允許總誤差的1/4.

精密度分析：按下面公式計算精密度： 。其中，ri為樣本內(nèi)i水平的濃度平均值，rij為樣本的濃度值，L為樣本數(shù)，R為重復(fù)檢測次數(shù)。精密度可用絕對偏差或相對相對偏差表示。當(dāng)為相對偏差時，SDr為CVr，式中ri為1，rij為樣本ij的濃度值比i水平濃度均值的百分比。和線性回歸分析類似，精密度分析中，也需要預(yù)先設(shè)定一個可接受限值，當(dāng)SDr為CVr超過設(shè)定限值時，不能繼續(xù)進(jìn)行線性評價，需要找到可能引起精密度差的原因，重新實驗后再進(jìn)行線性評價。和允許誤差的事先設(shè)定值一樣，精密度SDr或CVr應(yīng)符合企業(yè)注冊標(biāo)準(zhǔn)的相應(yīng)要求，而且是不同檢測項目和濃度區(qū)間依賴的。一般CVr設(shè)定為5%，但在高濃度檢測區(qū)間，可為10%，甚至更高。