高保真PCR預(yù)混液（2×PCR Master Mix）

本產(chǎn)品為2×濃度的PCR混合液，其除了含有PCR擴(kuò)增常用的dNTP和Mg²⁺之外，還含有一種基于基因工程改造的新一代高保真酶，其具有極高的擴(kuò)增效率和高保真性，同時(shí)增加的特殊擴(kuò)增促進(jìn)劑也使擴(kuò)增效果進(jìn)一步增加。此酶具有 5'→3'DNA聚合酶活性以及3'→5'外切酶活性，擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端，可用于后續(xù)同源重組等試驗(yàn)。

產(chǎn)品應(yīng)用

本品適用于以基因組DNA、cDNA、質(zhì)粒等模板的PCR反應(yīng)。

運(yùn)輸與保存

-30°C～ -15°C保存，低溫運(yùn)輸。

試驗(yàn)操作

• 反應(yīng)體系
  

  組分	體積（μL）
  ddH2O	Up to 50
  2×PCR Master Mix	25
  模板	X
  正向引物（10 μM）	1
  反向引物（10μM）	1

  注：模板推薦量為基因組DNA：50-150ng；質(zhì)粒：5-50ng；cDNA：1-5μl（不超過(guò)反應(yīng)體積的1/10），使用前請(qǐng)于冰上融化，震蕩瞬時(shí)離心。

• 反應(yīng)程序
  

  程序	溫度（℃）	時(shí)間	循環(huán)數(shù)
  預(yù)變性	95	3min	1
  變性	95	15s	35
  退火a	根據(jù)引物而定	15s
  延伸b	72	15s
  延伸	72	5min	1
  保存	4	∞	1

  a.退火溫度：一般設(shè)置為引物Tm值±3℃左右即可； b. 延伸時(shí)間：一般模板設(shè)置為15s/kb，對(duì)于一些困難模板，可延伸至20-30s/kb范圍之間調(diào)整。

注意事項(xiàng)

1. 請(qǐng)使用高質(zhì)量模板。
2. 避免反復(fù)凍融此產(chǎn)品，因?yàn)檫@會(huì)降低酶的活性。
3. 此產(chǎn)品僅供科研使用，不適用于臨床診斷或治療。
4. 請(qǐng)勿將此產(chǎn)品用于任何非法目的。

常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法